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R-PE 藻紅蛋白

簡要描述:R-PE 藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)出強(qiáng)烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。用常規(guī)的標(biāo)記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結(jié)合起來制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細(xì)胞表面抗原檢測、流式細(xì)胞熒光測定等抗體熒光標(biāo)記以及活體成像應(yīng)用等診斷及生物工程技術(shù)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):78GD10007
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-11-30
  • 訪  問  量:2587

詳細(xì)介紹

品牌BIOHUB供貨周期兩周
應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)
R-PE 藻紅蛋白產(chǎn)品描述
藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)出強(qiáng)烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。用常規(guī)的標(biāo)記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結(jié)合起來制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細(xì)胞表面抗原檢測、流式細(xì)胞熒光測定等抗體熒光標(biāo)記以及活體成像應(yīng)用等診斷及生物工程技術(shù)。
R-PE 藻紅蛋白產(chǎn)品性質(zhì)
分子量:約 240,000 道爾頓
組成:蛋白的亞基組成為(alpha-beta)6gamma。每個(gè)alpha-亞基和 beta-亞基約 20,000 道爾頓,每個(gè)
gamma 亞基約 30,000 道爾頓。
純度: Amax/A280 > 5.5
激發(fā)波長: :450-500 nm
發(fā)射 波長: :575 ± 5 nm
形態(tài):硫酸銨沉淀
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、該產(chǎn)品為硫酸銨沉淀,將其置換至20mM 磷酸鹽緩沖液中使用。
2、在較寬的 pH 范圍內(nèi)具有較寬的吸收光譜,比較容易選擇合適的激發(fā)波長,從而得到高效熒光發(fā)射,
且激發(fā)時(shí)有特異的熒光發(fā)射峰;
3、吸光度和熒光量子產(chǎn)率很高,熒光強(qiáng)而穩(wěn)定,靈敏度高;
4、具有較小的熒光背景,不易淬滅,熒光保存期較長;
5、易與其他分子交聯(lián)結(jié)合,非特異性吸附少;
6、chun天然海洋生物提取,無任何毒副作用,不含放射性,操作使用非常安全。易與抗體、生物su、
親合素、 免疫蛋白等物質(zhì)結(jié)合,制成熒光探針。
使用方法
使用方法
抗體標(biāo)記(僅供參考)
試驗(yàn)材料:
藻紅蛋白:分子量約 240000 道爾頓;PD-10 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25M) ,安瑪西亞 Amersham公司產(chǎn)品,產(chǎn)品目錄號(hào) No. 17-0851-01; NAP5 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25 DNA grade), 安瑪西亞Amersham 公司產(chǎn)品,產(chǎn)品目錄號(hào) No 17-0853-02;琥珀酰亞胺-4-(N- 甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC),Pierce 公司,產(chǎn)品目錄號(hào) No.22360;N-乙基馬來酰胺(NEM),Sigma 公司,產(chǎn)品目錄號(hào) E-1271;二甲基亞砜(DMSO),Aldrich 公司,產(chǎn)品目錄號(hào) No. 27,685-5。
試驗(yàn)方法:
1、藻紅蛋白溶液
將藻紅蛋白沉淀復(fù)溶為溶液,用脫鹽柱或超濾管除鹽并將其緩沖液置換為20mM 磷酸鹽緩沖液,調(diào)整藻紅蛋白的最終濃度為5-10毫克/毫升。
2、藻紅蛋白的衍生化
將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無水二甲基亞砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻紅蛋白添加 11 微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)
(SMCC),鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng) 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應(yīng)生成衍生化的藻紅蛋白。交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠層析柱,將衍生化的藻紅蛋白過柱,收集藻紅蛋白峰。
3、抗體的處理
二硫蘇糖醇(DTT)溶解于蒸餾水中,配制成 1 摩爾/升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,調(diào)整抗體的濃度,使其濃度至少為 4 毫克/毫升。
每毫升抗體溶液中加入 20 微升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,室溫靜置反應(yīng) 40 分鐘,將抗體的二硫鍵打開形成巰基。交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠柱,將反應(yīng)液過柱,收集抗體部分。
4、藻紅蛋白和抗體的共價(jià)交聯(lián)
每毫克抗體加入 3.2 毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅蛋白,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng) 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的馬來酰亞胺基和抗體上的巰基實(shí)現(xiàn)共價(jià)交聯(lián)。
10 毫克的 N-乙基馬來酰胺(NEM)溶解于 1.0 毫升的無水二甲基亞砜(DMSO)中制成 N-乙基馬來酰胺(NEM)母液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。每毫克抗體中加入 3.4 微升N-乙基馬來酰胺(NEM)母液,鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng) 60 分鐘, 反應(yīng)后,使抗體上的巰基封閉。
5、交聯(lián)物的存儲(chǔ)
將交聯(lián)物于存儲(chǔ)緩沖液中透析后保存于2-8℃。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作!
本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
運(yùn)輸及保存方法
儲(chǔ)存條件:2-8°C 避光保存,勿冷凍。
穩(wěn)定性:在適宜條件下至少可以儲(chǔ)存12個(gè)月。

 

 

 

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